光照射到物質(zhì)上發(fā)生彈性散射和非彈性散射,彈性散射的散射光是與激發(fā)光波長相同的成分,非彈性散射的散射光有比激發(fā)光波長長的和短的成分,統(tǒng)稱為拉曼效應(yīng)。
拉曼光譜分析技術(shù)是以拉曼效應(yīng)為基礎(chǔ)建立起來的分子結(jié)構(gòu)表征技術(shù),其信號來源與分子的振動和轉(zhuǎn)動。
拉曼光譜的分析方向有:
1、定性分析:不同的物質(zhì)具有不同的特征光譜,因此可以通過光譜進(jìn)行定性分析。
2、結(jié)構(gòu)分析:對光譜譜帶的分析,又是進(jìn)行物質(zhì)結(jié)構(gòu)分析的基礎(chǔ)。
3、定量分析:根據(jù)物質(zhì)對光譜的吸光度的特點,可以對物質(zhì)的量有很好的分析能力。
拉曼光譜技術(shù)的*性:
提供快速、簡單、可重復(fù)、且更重要的是無損傷的定性定量分析,它無需樣品準(zhǔn)備,樣品可直接通過光纖探頭或者通過玻璃、石英、和光纖測量,此外:
1、由于水的拉曼散射很微弱,拉曼光譜是研究水溶液中的生物樣品和化學(xué)化合物的理想工具。
2、拉曼一次可以同時覆蓋50~4000波數(shù)的區(qū)間,可對有機物及無機物進(jìn)行分析。相反,若讓紅外光譜覆蓋相同的區(qū)間則必須改變光柵、光束分離器、濾波器和檢測器。。。
3、拉曼光譜譜峰清晰尖銳,更適合定量研究、數(shù)據(jù)庫搜索、以及運用差異分析進(jìn)行定性研究。在化學(xué)結(jié)構(gòu)分析中,獨立的拉曼區(qū)間的強度可以和功能集團(tuán)的數(shù)量相關(guān)。
4、因為激光束的直徑在它的聚焦部位通常只有0.2~2毫米,常規(guī)拉曼光譜只需要少量的樣品就可以得到。這是拉曼光譜相對常規(guī)紅外光譜一個很大的優(yōu)勢,而且拉曼顯微鏡物鏡可將激光束進(jìn)一步聚焦至20微米甚至更小,可分析更小面積的樣品。
5、共振拉曼效應(yīng)可以用來有選擇性地增強大生物分子特個發(fā)色基團(tuán)的振動,這些發(fā)色基團(tuán)的拉曼光強能被選擇性地增強1000到10000倍。
拉曼光譜用于分析的不足
1、拉曼散射面積
2、不同振動峰重疊和拉曼散射強度容易受光學(xué)系統(tǒng)參數(shù)等因素的影響
3、熒光現(xiàn)象對傅立葉變換拉曼光譜分析的干擾
4、在進(jìn)行傅立葉變換光譜分析時,常出現(xiàn)曲線的非線性的問題
5、任何一物質(zhì)的引入都會對被測體體系帶來某種程度的污染,這等于引入了一些誤差的可能性,會對分析的結(jié)果產(chǎn)生一定的影響。